Выделение мембранных белков - Интегральные белки

Содержание
Выделение мембранных белков
Структура мембранных белков
Выделение мембранных белков
Солюбилизация мембранных белков. Периферические белки
Интегральные белки
Характеристика очищенных интегральных мембранных белков
Определение молекулярной массы субъединиц (электрофорез в пааг)
Определение молекулярной массы нативного белка с помощью гидродинамических методов
Метод радиационной инактивации
Спектральные методы
Метод кругового дихроизма
Инфракрасная спектроскопия и спектроскопия комбинационного рассеяния
ЯМР-спектроскопия
Определение ферментативной активности
Изучение стехиометрии субъединиц
Изучение трехмерной структуры с помощью рентгеновской дифракции и реконструкции изображения. Кристаллизация мембранных белков
Реконструкция изображения и двумерные кристаллы
Пример структурных исследований мембранных белков. Структура поринов
Заключение
Список литературы
Все страницы

 

Интегральные белки

При обработке мембран для получения интегральных мембранных белков могут высвобождаться или активироваться протеазы. Поэтому нередко на этой стадии приходится добавлять ингибиторы протеаз, даже если они уже были введены на предыдущих этапах выделения мембран. Существуют разные и довольно сложные смеси ингибиторов, которые можно использовать в зависимости от чувствительности системы к действию протеолитических ферментов. Весьма полезным, но не универсальным агентом является ингибитор сериновых протеаз, фенилметилсульфонилфторид (ФМСФ). Этот реагент хранят в концентрации 100 мМ в изопропаноле или этаноле и добавляют в инкубационную среду до концентрации 100 мкМ. Следует помнить, что он имеет довольно короткое время жизни в водных средах (ПО и 35 мин соответственно при рН 7,0 и 8,0 и 25tС). Для ингибирования SH-протеаз может оказаться полезным 10 мМ тетратионат натрия.



 












Регистрация доменов

Зарегистрируй себе домен!
Имя:


defin.ru



Конвертер величин


Что конвертируем:сколько:
соответствует:

Посетители

Сейчас 20 гостей онлайн